LAPORAN PRAKTIKUM
BIOLOGI DASAR
“MIKROORGANISME PERAIRAN”
Disusun Oleh:
Kelompok 4Fonda Daniswara
FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2009
-
PENDAHULUAN
-
- Latar Belakang
Menurut
Soemarwoto (1980), dalam ilmu Biologi cabang ilmu yang mempelajari
tentang mikroorganisme disebut dengan mikrobiologi, yang merupakan
dsalah satu ilmu tentang mahluk hidup. Mikroorganisme terdapat di segala
macam lingkungan sebagai bagian dari ekosistem alam. Sebagian dari
mikroorganisme itu adalah produsen, sebagian konsumen pertama dan
sebagian lagi konsumen kedua dan ketiga. Mikroorganisme dapat ditemukan
di daerah kutub, di daerah tropik, dalam air, dalam tanah, dalam debu di
udara, padaa tumbuhan, tubuh hewan, dan ,manusia. Mikroorganisme ini
mempunyai peranan penting dalam jaring – jaring makanan, yaitu berperan
sebagai pengurai utama (dekomposer) dari berbagai zat dan senyawa.
Berdasarkan
jenis makanannya mahluk hidup dibedakan dalam tiga dunia, yakni hewan,
tumbuhan, dan protista. Perbedaan ini didasarkan pdari perbedaan sosok
dan susunan dari tiap – tiap mahluk hidup. Hewan memperoleh makanannya
dari bahan organik siap pakai (C-heterotrof), yang di dalam tubuh, dalam
saluran cernanya mengalami proses pengolahan, pencernaan, dan
penyerapan. Jenis yang cara makannya amat berlainan (C-autotrof) adalah
tumbuhan, yang bentuk tubuhnya sama sekali lain. Bahan yang diperlukan
oleh tumbuhan untuk membentuk bentuk tubuhnya terdiri dari bahan
anoraganik dan memanfaatkan sinar matahari sebagai sumber energi
(Schmidt, 1994).
Menurut
Ratna (1986), sedangkan pada mikroorganisme dibagi menjadi dua, yaitu
mikroorganisme autotrof dan mikroorganisme heterotrof. Sebagian besar
merupakan fotoautotrof dan hanya sebagian kecil yang merupakan
heterotrof.
1.2 Maksud dan tujuan Maksud dilakukannya praktikum mikroorganisme di lingkungan perairan ini agar para praktikan dapat mengetahui bentuk, jumlah, dan macam – macam mikroorganisme khususnya yang terdapat di lingkungan perairan.
Tujuan diadakannya praktikum tentang mikroorganisme ini agar praktikan untuk meneliti jumlah nisbi mikroorganisme yang penyebarannya di lingkungan perairan .
1.3 Waktu dan Tempat
Praktikum biologi dasar ini dilaksanakan pada hari Senin, tanggal 16 November 2009. Pukul 10.30-13.00 WIB.
Dan dilaksanakan di laboratorium Ilmu-Ilmu Perairan (IIP) di gedung C . Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Brawijaya , Malang .
-
TINJAUAN PUSTAKA
-
- Pengertian Mikroorganisme
Mikroorganisme adalah segala organisme kecil yang dapat dibiakkan dan dikembangkan dalam cawan petri atau inkubator di dalam laboratorium dan mampu memperbanyak diri secara mitosis. Namun ada yang berpendapat bahwa semua mikroorganisme mencakup semua prokariota, protista, dan alga renik (Amboinas, 2009).
-
- Macam-macam Mikroorganisme dilingkungan
Kelompok
|
Morfologi
|
Ukuran
|
Ciri penting
|
Kepentingan Praktis
|
Bakteri
|
Khas: 0,5 – 1,5 µm kali 1,0 – 3, 0 µm
Kisaran: 0,2 kali 100 µm
|
Prokariotik,
Uniselular, struktur internal sederhana. Tumbuh pada media buatan
laboratoris. Reproduksi aseksual; pembelahan sederhana.
|
Penyebab penyakit, menambah kesuburan tanah, merusak tanaman, untuk industri, dan mampu membuat makanan sendiri.
|
|
Sianobakteri
|
Kisaran:
5,0 – 15 µm
|
Prokariota, uniseluler, struktur internal sederhana, tumbuh pada media buatan laboratoris.
Reproduksi secara aseksual dan spora. Mengandung klorofil dan fotosintetik.
|
Sumber makanan hewan akuatik, membantu pembentukan dan memperkaya tanah.
|
|
Virus
|
Kisaran:
0,015 – 0,2 µm
|
Semua obligat parasit, tidak tumbuh pada media buatan, dan membutuhkan sel hidup guna reproduksi.
Dibutuhkan Mikroskop Elektron untuk melihatnya.
|
Penyebab penyakit pada manusia dan mahluk hidup lain. Dapat menginfeksi mikroorganisme.
|
|
Khamir
|
Kisaran:
5,0 – 10 µm
|
Eukariotik, Uniseluler, reproduksi aseksual dan penguncupan. Sifatnya mempunyai banyak kesamaan dengan bakteri.
|
Sebagai pembantu dalam produksi minuman alkohol, penyebab penyakit, pelengkap makanan.
|
|
Kapang
|
Kisaran:
2,0 – 100 kali beberapa mm
|
Eukariotik, multiseluler, kultivas-nya sama seperti bakteri. Reproduksi secara aseksual dan seksual.
|
Sumber makanan hewan akuatik, sumber agar bagi media laboratoris,sifat racun, dan sebagai pelengkap makanan.
|
|
Protozoa
|
Kisaran:
2,0 – 200 µm
|
Eukariotik, Uniseluler, kultivasinya sama seperti bakteri, parasit intraseluler, Reproduksi aseksual dan seksual.
|
Makanan hewan akuatik dan sumber penyakit.
|
|
Algae
|
Eukariotik,
uniseluler dan multiseluler. Hidup di lingkungan akuatik, memiliki
klorofil dan fotosintetik. Reproduksi aseksual dan seksual.
|
Merupakan
sumber produksi makanan bagi lingkungan akuaitk, sumber agar bagi
media laboratoris, sifat racun, dan sebagai pelengkap makanan.
|
-
- Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme
-
Faktor intrinsik
-
pH
Keasaman dan kebasaan dari lingkungan memiliki pengaruh yang signifikan
pada aktifitas dan stabilitas makromolekul seprti enzim, maka dari itu
pertumbuhan dan metabolisme dari mikrobe sangat dipengaruhi pH. Sebagian
besar mikroba dapat tumbuh dengan baik pada kisaran pH netral (6,6 –
7,5) dan sedikit yang dapat bertahan di bawah pH 4,0. Bakteri sangatlah
rentan terhadapa pH ekstrim dibandingkan dengan kapang dan khamir,
dimana bakteri patogenlah yang paling rentan. Itulah sebabnya sebagian
besar makanan seperti saurkraut, pikel dan keju, diawetkan dengan
bakteri patogen dengan asam yang diproduksi melalui fermentasi bakteri.
-
Aktivitas air ( activity of water )
Salah satu dari metoda penimpanan adalah pengeringan. Pengeringan
dilakukan dengan melakukan pengeluaran air yang terikat dari bahan yang
mengakibatkan mikroba tidak mudah tumbuh. Secarra umum bakteri
memerlukan nilai Aw yang lebih tinggi dibandingkan jamur, dimana bakteri
gram positif memerlukan nilai Aw lebih rendah dibandingkan bakteri gram
negatif. Sebagian besar bakteri merugikan tidak dapat tumbuh di bawah
Aw 0,91 seadangkan kapang merugikan dapat tumbuh pada Aw paling rendah
0,80.
-
Kemampuan mengoksidasi – reduksi (redox potential)
Potensial Oksidasi Reduksi substrat dapat didefinisikan sebagai
perubahan yang diakibatkan oleh substrat yang kehilangan (oksidasi)
maupun mendapatkan elektron (reduksi). Mikroba aerob memerlukan Eh
positif (oksidasi) sedangkan mikroba anaerob memerlukan Eh negatif
(reduksi). Bakteri dapat tumbuh pada kondisi sedikit reduksi dengan baik
dinamakan mikroaerofil. Contohnya adalah lactobacilli dan Streptococci.
[Oksidasi] + H+ + n Elektron [Reduktan]
-
Kandungan nutrien
Nutrisi (nutrien) yang dibutuhkan mikroba agar tumbuh normal, diantaranya:
-
Air
-
Sumber Energi
-
Sumber Nitrogen
-
Vitamin dan faktor pertumbuhan
-
Mineral.
Pentingnya
air untuk tumbuh sudah dapat di kelompokkan sebagai berikut: kapang
mempunyai kebutuhan air paling minimal, diikuti khamir, bakteri gram
negatif dan baktri gram positif. Sebagai sumber energi, mikroba
memanfaatkan gula, alkohol, dan asam amino serta lemak, namun hanya
sedikit yang memanfaatkannya. Sumber Nitrogen utama yang dimanfaatkan
oleh mikroba heterotrofik yaituasam amino. Vitamin B juga dimanfaatkan
dalam jumlah yang rendah.
-
Bahan anti mikroba dan struktur bahan makanan
Komponen antimikroba misalnya minyak asiri, eugenol pada cengkeh dan aksin pada bawang putih.
-
Faktor Ekstrinsik
-
Suhu
Berdasarkan kisaran suhu mikroba digolongkan menjadi 3 kelompok, yakni:
psikrifillik (mikroba yang suka terhadap suhu dingin), mesofilik
(mikroba suka suhu sedang), dan termofilik (mikroba suka suhu tinggi).
-
Keteresediaan dan konsentrasi gas di lingkungan
Peningkatan konsentrasi CO2
menjadi kira – kira 10% dapat menghambat pertumbuhan mikroba. Hal ini
dikenal dengan Controlled / Modified Atmosphere Storage (CAS/MAS).
Secara umum penggunaan efek penghambatan CO2 akan dapat ditingkatkan pada suhu rendah, karena kelarutan CO2 akan meningkat pada suhu rendah.
-
Relativity Humidity (RH)
RH dari ruangan adalah point penting yang mempengaruhi Aw, dan
pertummbuhan mikroba pada permukaan suatu bahan. Jika Aw 0,6 adalah
sangat penting untuk menyimpan dan mempertahankan nilai Aw pada kondisi
RH yang tidak memungkinkan adanya pengambilan air dari udara menuju ke
dalam permukaan bahan.
-
- Pengertian Sterilisasi
Sterilisasi
adalah proses yang menghancurkan semua bentuk kehidupan. Suatu benda
yang steril dipandang dari sudut mikrobiologi, artinya bebas dari
mikroorganisme hidup (Pelczar, 1988).
Sterilisasi
(sterilization) yaitu proses pemusnaan total semua mikrop dan organisme
lain yang dapat hidup dalam lingkungan atau material dengan cara-cara
fisik dan / atau kimia (Rifal , 2004).Menurut Yatim (2007), Sterilisasi (sterilization ) : mensterilkan barang , ruangan , atau lingkungan , agar bebas dari kuman penyakit . Misal memanaskan dalam oven suhu 100 C dengan memberi uap panas dan bertekanan atmosfer tinggi dalam alat autokalav denagan radiasi sinar radioaktif , ultraviolet atau microwave, atau dengan memasukkan ke bahan sterilant.
Sterilisasi , mematikan semua bentuk kehidupan dalam daerah tertentu. ( Wheller , 1988).
-
- Pengertian Media dan PCA
Klasifikasi media pertumbuhan mikroorganisme
Klasifikasi | Nama |
Contoh
|
Sumber Nutrien
Keadaan fisik
Komponen kimiawi
Penyusun
Persyaratan nutri bakteri
|
Alamiah
Buatan / Artifial Padat – Ireversibel
Padat-peversibel
Setengah padat
Cair
Kompleks (komposisi)
“know”)
Kimiawi-sintetik (komposisi “know”)
Endrichmen media (media di perkaya )
Diferinsial media (media
Di definisial)
Selected media ( media terpilih )
Test media (media uji)
|
Susu , kaldu
Campuran zat kimia
Serum darah berkoagulasi
Agar nutrien
Agar lunak
Kaldu nutrien
Agarnutrien
Amonium sulfat , medium garam , glukosa .
Kaldu infusi jantung
Agar eosin biru metilen
Agar deoksilat
Media uji vit B12 |
-
- Cara Perhitungan Bakteri
- Perhitungan jumlah sel
-
- hitungan mikroskopik
- hitungan cawan
- MPN (most probable number)
- Perhitungan massa sel secara langsung
-
- cara volumetric
- cara grafimetrik
- tumbidimetri (kekeruhan)
* analisis komponen sel (protem , AND , ATP , dan sebagainya )
* analisis produk katabolisme ( meta bolit primer , metabolisme sekunder , panas)
* analisa konsumsi nutren (karbon , nitrogen , oksigen , asm amino , mineral dan sebagainya ) .
Metode volum
metric , pengukuran volume dan berat sel di lakukan terlebih dahulu
dengan menyaring mikroorganisme tersebut . Oleh karma itu , bila
suptrat tempat tumbuhnya banyak mengandung padatan , misalnya badan
pangan , sel mikroorganisme tidak dapat di ukur dengan menggunakan volum
metrik maupun dengan turbina metri . Perhitungan massa sel secara tidak
langsung sering di gunakan dalam mengamati pertumbuhan sel selama
proses fermetasi , di mana komponen suptrat atau bahan yang di
difermentasi , dapat di amati dan di ukur .
Cara perhitungan Mikroskopik : - Metode petroff-hausser
Jumblah sel / mm2
Jumblah sel /mm3
Jumblah sel / cm (ml)3
Jumblah sel per ml sampel = jumblah sel per kotak besar x 253 x 50 x10
3. METODOLOGI
-
- Alat dan fungsi
-
Erlemeyer : sebagai tempat pembuatan media
-
- Cawan petri : sebagai tempat media
- Water bath : untuk memanaskan pada media
- Autoklaf : untuk menstrilkan cawan Petri
- Bunsen : mengaseptiskan cawan Petri
- Spatula : untuk mengaduk larutan PCA
- Incase : untuk menginkubasi pada suhu ruang PCA 27 oC
3.2 Bahan dan fungsi
Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum biologi dasar ini adalah sebagai berikut-
PCA media untuk menumbuhkan mikroorganisme
-
Koran untuk membungkus cawan petri
-
Tali untuk mengikat cawan petri yang telah dibungkus dibungkus oleh kertas koran
-
Kertas label untuk menandai sampel
-
Spirtus untuk bahan bakar bunsen
-
Aquades sebagai pelarut
-
-
Skema kerja
-
Praktikum Biologi Dasar ini dilaksanakan dengan skema kerja sebagai berikut:
-
Sterilisasi
Dicuci
Dikeringkan
Dibungkus Koran
Diikat dengan tali
Dimasukkan autoklaf
Autoklaf
Dilihat airnya
Dimasukkan saringan bawah keranjang
Ditutup
Dinyalakan autoklaf
Disterilisasi 15-20 menit
Dikeluarkan alat
Didinginkan
Hasil
-
Pembuatan Media
Dimasukkan tabung erlenmeyer 5000 ml
PCA dan Aquades
Diaduk hingga larut dengan spatula
Ditutup kapas pada melut tabung erlenmeyer
Di bungkus dengan koran
Dihomogen kan
Disterilisasi basah
Hasil
-
PCA Hangat
PCA
Dituang pada cawan petri masing-masing 15 ml
Didinginkan
Dibalik
Dibungkus Koran dan diikat dengan tali
Disimpan dalam kulkas jadi PCA hangat
-
Penanaman
Media PCA beku
Dibuka 10 menit dan ditiup
Ditutup
Dibalik
Dibungkus Koran
Diinkubasi 24 jam
Hasil
e. Penghitungan Koloni
Cawan petri berisis medium
Dikeluarkan dari incase
Dihitung koloni yang tumbuh dengan coloni counter
Hasil
4. PEMBAHASAN
-
-
Data hasil pengamatan
-
-
Komponen PCA = Agar : 5 gr
Pepton : 5 gr
Extract yeast : 2,5 gr
+
Glukosa : 1 gr
17,5 gr
-
Membuat media PCA
Ditimbang sesuai komposisi = 17,5 gr x 15 ml x 90 = 23,6
1000
-
Pengenceran
= 1350
-
-
Analisa Prosedur
-
Dalam
praktikum ini dilakukan 4 tahap, yaitu sterelisasi, pembuatan media,
pemanasan dan perhitungan bakteri. Sebelum melakukan tahap pertama
sterilisasi disiapkan alat dan bahan yang digunakan. Alat yang digunakan
antara lain, cawan petri, autoklaf, erlenmeyer, waterbath, incase,
bunsen dan spatula, sedangkan bahan-bahan yang digunakan antara lain
medium agar steril (PCA), koran, tali, kertas label, spirtus dan
aquades.
Langkah-langkah
yang dilakukan pada tahap sterilisasi yaitu pertama disiapkan cawan
petri yang kemudian dibungkus koran dan tali, setelah itu cawan petri
yang dimasukkan ke dalam autoklaf untuk melestarikan cawan petri
tersebut, kemudian suhu dari autoklaf dinaikkan hingga 200f,cawan petri
disterilisasi slama 15 menit.
Tahap kedua adalah
pembuatan media, pertama disiapkan PCA yang kemudian ditimbang 8,4 gram
dan Aquades sebanyak 480 ml, kemudian PCA dan Aquades dimasukkan kedalam
erlenmeyer kemudian diaduk dengan spatula hingga larut lalu erlenmeyer
ditutup dengan kapas pada mulut erlenmeyer, erlenmeyer dibungkus koran
dan ditalikan lalu dihomogenkan. Setelah itu di sterilisasi basah dengan
autoklaf PCA yang telah di sterilisasi (PCA hangat) di tuangkan dalam
cawan petri kemudian didinginkan setelah dingin, cawan petri dibalik dan di ikat, setelah itu disimpan didalam kulkas.
Kemudian
tahap ketiga dilakukan yaitu tahap penanaman organisme atau bakteri,
media PCA beku yang telah jadi diberi dua perlakuan, yaitu dibiarkan
terbuka agar organisme yang ada di lingkungan sekitar dapat hinggap di
media dan ditutup untuk mengetahui bakteri/ organisme yang ada pada
mulut. Untuk yang dibiarkan terbuka cawan petri diletakkan dan kemudian
dibuka selama 10 menit lalu ditutup dan dibungkus koran serta diikat/
ditali. Setelah itu media PCA beku di inkubasi dalam incase selama 5
hari, untuk yang ditutup, media PCA beku ditiup, kemudian ditutup dan
dibalik agar tidak ada gelembung air yang terbentuk. Setelah itu
dibungkus koran dan ditali. Setelah itu media PCA di inkubasi selama 1
hari dalam incase. Setelah 1 hari dilakukan pengamatan apakah sudah
tumbuh bakteri atau organisme yang tumbuh dan dilakukan perhitungan
koloni. Cawan yang bermodium (sudah di inkubasi) di kekarkan dari incase
kemudian di hitung koloni counter, di catat jumlah koloni yang tumbuh.
-
-
Analisa hasil
-
Pada komponen PCA terdapat 5 gr agar, 5 gr pepton, 2,5 gr extract yeast, dan 1 gr glukosa. Yang jumlah seluruhnya ada 17,5 gr.
Pada
pembuatan medium PCA yaitu PCA ditimbang sesuai komposisi yaitu 17,5 gr
PCA dibagi dengan 1 liter air dikali 15 ml dikalikan banyak cawan petri
(90) dan hasilnya 23,6.
Pada pengenceran dilakukan perhitungan 15 ml air dikalikan banyak cawan petri (90) dan hasilnya 1350.
5.PENUTUP
-
-
Kesimpulan
-
Berdasarkan pengamatan yang telah dilakukan dapat diambil kesimpilan bahwa:
-
Mikroorganisme atau mikroba adalah organisme yang berukuran sangat kecil (biasanya kurang dari 1 mm) sehingga untuk mengamatinya memerlukan alat bantu. Mikroorganisme seringkali bersel tunggal (uni selluler) meskipun beberapa protista bersel tunggal masih terlihat oleh mata telanjang dan ada beberapa spesies multisel tidak terlihat mata telanjang. Banyak berbagai macam mikroorganisme dilingkungan yaitu bakteri, jamur, protozoa, dan masih banyak lagi. Pertumbuhan mikroorganisme di pengaruhi oleh beberapa faktor yaitu waktu generasi, faktor intrinsik, faktor enktrinsik, faktor proses dan faktor imblisit.
-
Berdasarkan pengamatan dan perhitungan selama 3 hari pada cawan petri yang berada dalam incase, telah terdapat mikroorganisme atau telah tampak cawan petri, setelah itu di hitung dengan menggunakan koloni counter. Hasil yang dapat dilihat pada cawan petri yang di tiup jumlah yang besar ada 2 dan yang kecil 13, sedangkan yang dibuka atau diudarakan. Jumlah mikroorganisme tidak terhitung (sangat banyak).
-
-
Saran
-
Pada
kegiatan praktikum ini, sebaiknya alat dan bahan yang akan digunakan di
persiapkan terlebih dahulu, agar praktikan dapat berjalan dengan baik.
Dan untuk para praktikan agar mempersiapkan diri materi-materi yang akan
dipraktekkan, agar dalam kegiatan praktikum tidak terhambat.